電泳的種類有哪些?
移動界面電泳
是將被分離的離子(如陰離子)
混合物置于電泳槽的一端(如負極),在電泳開始前,樣品與載體電解質(zhì)有清晰的界面。電泳開始后,帶電粒子向另一極(正極)移動,泳動速度最快的離子走在最前面,其他離子依電極速度快慢順序排列,形成不同的區(qū)帶。只有第一個區(qū)帶的界面是清晰的,達到完全分離,其中含有電泳速度最快的離子,其他大部分區(qū)帶重疊。
區(qū)帶電泳
是在一定的支持物上,于均一的載體電解質(zhì)中,將樣品加在中部位置,在電場作用下,樣品中帶正或負電荷的離子分別向負或正極以不同速度移動,分離成一個個彼此隔開的區(qū)帶。區(qū)帶電泳按支持物的物理性狀不同,又可分為紙和其他纖維膜電泳、粉末電泳、凝膠電泳與絲線電泳。
等電聚焦電泳
是將兩性電解質(zhì)加入盛有pH梯度緩沖液的電泳槽中,當其處在低于其本身等電點的環(huán)境中則帶正電荷,向負極移動;若其處在高于其本身等電點的環(huán)境中,則帶負電向正極移動。當泳動到其自身特有的等電點時,其凈電荷為零,泳動速度下降到零,具有不同等電點的物質(zhì)最后聚焦在各自等電點位置,形成一個個清晰的區(qū)帶,分辨率極高。
等速電泳
是在樣品中加有領先離子(其遷移率比所有被分離離子的大)和終末離子(其遷移率比所有被分離離子的小),樣品加在領先離子和終末離子之間,在外電場作用下,各離子進行移動,經(jīng)過一段時間電泳后,達到完全分離。被分離的各離子的區(qū)帶按遷移率大小依序排列在領先離子與終末離子的區(qū)帶之間。由于沒有加入適當?shù)闹С蛛娊赓|(zhì)來載帶電流,所得到的區(qū)帶是相互連接的,且因“自身校正”效應,界面是清晰的,這是與區(qū)帶電泳不同之處。
電泳分離原理示意圖 a 移動界面電泳b 區(qū)帶電泳 c 等電聚焦電泳 d 等速電泳L 領先離子T 終末離子。